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一、模型評價(jià)實(shí)驗(yàn)方法
動(dòng)物行為學(xué)已逐漸成為一門工具學(xué)科應(yīng)用于人們生活中的各個(gè)領(lǐng)域,對于醫(yī)學(xué)工作更具有*的貢獻(xiàn),通過對動(dòng)物自身行為的研究,逐漸揭示人類生命的奧秘。許多疾病的臨床表現(xiàn),是通過患者的行為改變進(jìn)行判斷的。疾病的發(fā)生,與平時(shí)行為習(xí)慣密不可分。同樣,行為學(xué)也可以作為治療疾病的一種方法 。例如偏癱后的康復(fù)訓(xùn)練,多動(dòng)行為的矯正訓(xùn)練等等。動(dòng)物行為學(xué)的重要性不言而喻,在各個(gè)領(lǐng)域都能夠見到動(dòng)物行為學(xué)被廣泛應(yīng)用的現(xiàn)象。
1.1 學(xué)習(xí)及記憶能力
Morris 水迷宮實(shí)驗(yàn):通過測定不同入水點(diǎn)下實(shí)驗(yàn)動(dòng)物尋找并爬上平臺(tái)所需要的時(shí)間,是一種評價(jià)擬癡呆動(dòng)物模型的理想方法,用于評價(jià)動(dòng)物的學(xué)習(xí)和記憶能力。
空間搜索實(shí)驗(yàn):依次從一、二、三象限入水點(diǎn)將動(dòng)物放入水中,分別 3 次記錄動(dòng)物 90 s 內(nèi)在目標(biāo)象限的游泳時(shí)間(第四象限),有效區(qū)停留時(shí)間、經(jīng)過站臺(tái)次數(shù)、經(jīng)過有效區(qū)次數(shù)。多用于反應(yīng)動(dòng)物對事物記憶的保持能力。
探孔實(shí)驗(yàn) :將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放于探孔板(4×4 排列)的中心,記錄實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在 3、4、5 min 時(shí)將頭深入探孔中的次數(shù)。為評價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物基本探索能力的檢測。又稱洞板實(shí)驗(yàn),是基于小鼠具有探洞的天性,從而評價(jià)其對新環(huán)境的探索能力 。隨著時(shí)間的延長及反復(fù)進(jìn)入洞板儀次數(shù)的增多探洞次數(shù)明顯減少,從而產(chǎn)生適應(yīng)性的特點(diǎn),洞板實(shí)驗(yàn)也曾被一些學(xué)者應(yīng)用于評價(jià)對于小鼠的記憶力。1999 年,Brodkin研究東莨菪堿對于洞板實(shí)驗(yàn)小鼠記憶力的影響,以第yi次進(jìn)入洞板儀為熟悉行為,隨后多次進(jìn)入及探洞次數(shù),由此來評價(jià)記憶能力。
跳臺(tái)實(shí)驗(yàn) :給予箱底連續(xù) 5min 的交流電刺激,記錄每只大鼠收到電擊后跳上平臺(tái)的次數(shù),此為正常的躲避傷害性刺激的反應(yīng)。將大鼠跳上平臺(tái)的次數(shù)作為學(xué)習(xí)成績。24 h 后重新實(shí)驗(yàn),在通電的情況下,直接將大鼠置于平臺(tái)上,記錄其第yi次跳下平臺(tái)的潛伏期和 5 min 內(nèi)的錯(cuò)誤次數(shù)作為記憶的成績。常用于評價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的記憶能力。
Y 形迷宮實(shí)驗(yàn) :給予溫和的足部電擊,行為反應(yīng)為動(dòng)物逃避曾經(jīng)遭受過電擊刺激的地方,以每只大鼠受到電擊的次數(shù)作為學(xué)習(xí)成績,24 h 后重新測試時(shí)的潛伏期和錯(cuò)誤次數(shù)則作為記憶的成績。能夠簡便的對學(xué)習(xí)記憶能力進(jìn)行評價(jià)。
被動(dòng)回避實(shí)驗(yàn) :第 1 天將動(dòng)物放入有照明的箱內(nèi),實(shí)驗(yàn)動(dòng)物會(huì)通過小門進(jìn)入暗箱,讓其滯留于暗箱中 30 s 后放回籠中。第 2 天同第 1 天,但是待其在暗箱中時(shí),給予足底電擊,持續(xù) 1.5 s 后取出動(dòng)物。第 3 天時(shí)記錄動(dòng)物從照明箱進(jìn)入暗箱的延遲時(shí)間。延遲的時(shí)間越長,代表其學(xué)習(xí)能力越好。
1.2 耐力及運(yùn)動(dòng)能力
轉(zhuǎn)棒實(shí)驗(yàn) :實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在轉(zhuǎn)棒儀器上以4 r/min的速度適應(yīng) 10 min 后,休息 30 min,以勻速 10 min 內(nèi) 4~40 r/min,記錄實(shí)驗(yàn)動(dòng)物掉下的速度和轉(zhuǎn)棒上保持的時(shí)間,用于評價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的運(yùn)動(dòng)能力。
采用踏步實(shí)驗(yàn) :實(shí)驗(yàn)動(dòng)物沿著柵格移動(dòng)時(shí),前肢或后肢踩空,記錄為一次錯(cuò)誤。正常的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,精細(xì)運(yùn)動(dòng)能力較好,踩空次數(shù)較少。而在缺血中風(fēng)模型實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中,踩空次數(shù)發(fā)生較多。檢測時(shí),動(dòng)物從一端放入,記錄 100 步所用時(shí)間、發(fā)生錯(cuò)誤次數(shù)。
跑步機(jī)實(shí)驗(yàn) :將小鼠置于動(dòng)物用跑步機(jī)上,在跑步機(jī)后部給予電擊。如果動(dòng)物在后方點(diǎn)擊區(qū)域的停留時(shí)間超過 4 s,反應(yīng)為動(dòng)物力竭。記錄動(dòng)物跑動(dòng)的長時(shí)間及受電擊次數(shù)。動(dòng)物耐力用單位時(shí)間內(nèi)受電擊的次數(shù)表示。
1.3 協(xié)調(diào)能力
平衡棒實(shí)驗(yàn) :采用兩個(gè)平行棒(直徑 1 cm,長115 cm,間距 2.5 cm),末端與平臺(tái)(15 cm×50 cm)相連接,記錄雙后肢位于平行杠上的時(shí)間,一側(cè)后肢掉下或者摔倒、搖擺等情況。記錄每分鐘每米的錯(cuò)誤次數(shù)。用于評價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物后肢的協(xié)調(diào)能力。
爬桿實(shí)驗(yàn) :將小鼠放在棒的頂端,頭部向下,使小鼠自然向下爬行。分級標(biāo)準(zhǔn)為,0 級:一步步向下爬;1 級:向下滑行;2 級:不能抓住棒;3 級:翻正反射消失。則是用于評價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物協(xié)調(diào)性的實(shí)驗(yàn)。
1.4 自發(fā)活動(dòng)能力
曠場實(shí)驗(yàn):將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物放入 25 cm×25 cm×25 cm 的空箱,與曠場中央放入單只實(shí)驗(yàn)動(dòng)物,予自由活動(dòng) 10 min。試驗(yàn)后噴灑酒精消除味道,進(jìn)行下一只動(dòng)物的實(shí)驗(yàn)。分析實(shí)驗(yàn)動(dòng)物在中央?yún)^(qū)域和周邊區(qū)域的活動(dòng)距離和時(shí)間。用于評價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物自發(fā)活動(dòng)情況。
高架十字迷宮實(shí)驗(yàn) :由兩條開臂和兩條閉臂組成,呈相互垂直“十”字形,實(shí)驗(yàn)動(dòng)物頭朝開臂,放入其中,予自由活動(dòng) 5 min,分析小鼠進(jìn)入開臂和閉臂的時(shí)間及次數(shù)。用于評價(jià)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物對于新奇環(huán)境的焦慮反應(yīng)。
Lat 實(shí)驗(yàn) :為給予大鼠一個(gè)視覺空間注意目標(biāo),分別記錄大鼠穿越角落的頻數(shù)(自發(fā)活動(dòng)水平),直立和斜搭在墻上的頻率(非選擇性注意的水平)。Lat 迷宮實(shí)驗(yàn)在大鼠自發(fā)活動(dòng)及非選擇性注意水平的評價(jià)中可靠性非常高,已經(jīng)成為有關(guān)注意缺陷疾病的常用模型之一。
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